买一送一｜小鼠基因型鉴定试剂盒

由武汉有度生物科技有限公司开发的“小鼠基因型鉴定试剂盒”获得了众多客户的好评，现优惠促销“499元/100次，买一送一”，活动至9月30日，欢迎咨询！

小鼠基因型鉴定试剂盒说明书

Mouse Genotyping Kit Manual

产品简介

本产品包含DNA粗提取及PCR扩增的整套试剂，适用于小鼠基因型快速鉴定。该产品可从小鼠尾巴、脚趾或耳朵等组织中快速提取基因组DNA，无需进行组织匀浆、DNA的抽提沉淀、吸附柱法或磁珠法纯化等操作，产物直接用于PCR扩增，显著简化实验流程。

表1 基因型鉴定试剂盒产品明细

* 该组分低温时会出现结晶，37℃水浴加热或室温溶解至澄清透明状即可使用，后续置于室温保存。

操作流程

1. DNA提取

1.1 采样：鼠尾尖2~3 mm，鼠耳2~5 mm2，脚趾1枚。采样后若不立即进行样品消化，需保存于-20℃或更低温度，在消化前避免反复冻融。

1.2 消化液配制：每个样本按照47 μL Lysis Buffer和3 μL Proteinase K配制样本消化液。

1.3 样本消化：确保消化液完全浸没样本后，可选择以下方法进行样本的消化。

表2 消化方式

1.4 灭活：消化完成的样本，于PCR仪99 ℃处理10 min以灭活蛋白酶K，随后冷却至室温或4℃。

1.5 稀释：灭活完成的样本加130 μL的ddH2O以稀释DNA，随后混匀，2000 rpm离心1 min将消化剩余的毛发、骨头等固态杂质离心于管底，后续PCR试验取上清作为模板。

1.6 保存：提取的DNA产物可短期保存于4 ℃，长期可置于-20 ℃或更低温度，避免反复冻融。

2. PCR扩增

表 3 PCR体系

2.1 引物：上下游引物可预混到一起作为Primer mix，使用时加1 µL即可。

2.2 PCR mix：建议先配制预混液，即将ddH2O、2× Taq Mix和Primer mix预混。建议计算约5%富余量，例如100份样品配制105份试剂。

2.3 加样：将19 µL PCR mix分装至PCR八连管或96孔PCR板后，再分别加入1 µL DNA上清。

2.4 混匀：扣紧管盖或封膜后涡旋振荡5 sec，离心10 sec。

2.5 上机：使用普通PCR仪进行扩增。根据自身需求选择表4的Touchdown程序或表5的常规PCR程序。

表4 Touchdown程序

表5 常规PCR程序

* 根据设计的引物选择合适的退火温度，通常为引物Tm值减5℃。

2.6 电泳：PCR产物可根据条带大小，选择不同浓度的凝胶进行电泳，后续根据电泳结果进行基因型分析。