预防牛棒状杆菌的措施

来源：维通利华

1. 硬件设施：大小鼠应饲养在SPF级动物设施中，具体硬件指标应符合GB 14925的要求。建议免疫缺陷鼠在单独屏障房间饲养，且使用IVC或隔离包。

2. 仪器设备，实验器材：笼盒、笼架等采取高温（≥80℃）和/或高压灭菌的方式进行消毒，不适合高压的仪器设备、实验器材使用含有效氯2000mg/L的消毒液（或1：5：1 CLIDOX）或同等效力消毒剂进行表面擦拭。

3. 物料：采用辐照或高压灭菌的饲料、垫料、水，定期进行无菌检测；其余物料进行高压或其他灭菌方式处理，保证灭菌效果。

4. 人员：固定人员（饲养员、实验员）进行同一房间的动物处理，不交叉处理其他房间内动物。若实验人员同时进行不同实验项目，则应保证先操作裸鼠品系，再操作其他品系。

5. 动物进入：进入设施前需确保动物不携带牛棒状杆菌。动物到达设施后，使用消毒剂进行外包装消毒后，经传递窗进入动物房，并在超净台中打开运输箱，将动物转入饲养盒中。

6. 日常清洁消毒：不只局限于动物房的饲养间，其它包括实验间、走廊、更衣室、缓冲间等，都应使用含有效氯400～700 mg/L的消毒液（或1:18:1 CLIDOX）进行地面、墙面、天花板、桌面、房门、笼架、笼具及其他设备外表面等的消毒。

7. 日常饲养：每日观察并记录动物健康状态。如发现动物异常需及时隔离，并采取相应措施。免疫缺陷动物与免疫正常动物在分开的房间中饲养，垫料更换、饲料饮水添加需要在超净台中进行，超净台使用前后均使用消毒剂消毒。

8. 移植物使用前检测：移植物接种前必须进行牛棒状杆菌检测，结果为阴性方可使用。

9. 笼盒操作：尽可能减少笼盒操作，若同一房间内放置了多个批次、多种品系的动物，建议先操作免疫缺陷鼠。

• 饲养/实验人员应穿着全套灭菌PPE（隔离衣、口罩、头套、鞋套、手套等），操作前使用含有效氯2000mg/L的消毒液（或1:5:1 CLIDOX）充分消毒手套，同时建议佩戴双层手套，并密封手套与袖口连接处；

• 在关闭超净台或生物安全柜紫外灯之前，应确保已照射灭菌20min。开启通风，再次使用含有效氯2000mg/L的消毒液（或1:5:1 CLIDOX）进行内部喷雾消毒；

• 从笼架上取下笼盒，使用含有效氯2000mg/L的消毒液（或1:5:1 CLIDOX）喷雾笼盒外表面，并放置于超净台或生物安全柜中；

• 在超净台或生物安全柜中操作笼盒时，应确保双手位于风幕内10cm；

• 将小鼠从脏盒转移至新盒中时，建议使用镊子，而且最好交替使用2把。一把在用时，另一把可浸泡于含有效氯2000mg/L的消毒液（或1:5:1 CLIDOX）中消毒，镊子浸泡消毒的时间应不低于3min。同一笼盒动物可使用同把镊子，但不同笼盒需更换不同镊子。消毒剂应保证当天新鲜配制，以防有机碎屑积累过多而导致消毒效果降低。

• 操作完一个笼盒，应使用酒精对手套进行喷雾消毒，然后再进行下一笼盒的操作。每操作完同一个实验项目、同一个动物品系或一面IVC笼架（最多不超过70盒），都应及时更换新手套，以减少交叉感染的可能。

• 垃圾处理：脏垫料、实验废弃物、动物尸体等应及时封袋，储存于指定位置，无遗洒。每日垃圾应有专人负责收集，收集后该人员不得再接触动物，并用含有效氯2000mg/L的消毒液（或1:5:1 CLIDOX）对垃圾箱进行喷雾消毒。