2×PCR Mix (with dye) 使用说明书
产品简介
本产品包含PCR扩增过程所需成分并经过优化处理,实验过程只需加入引物和模板即可进行扩增,减少了移液操作,提高了检测通量和结果的准确性。本品含有红色染料,可在反应结束后直接进行电泳,无需再加上样缓冲液,使用方便。PCR产物的3'端带A,可直接克隆至T载体。
产品组分
组分 | 规格 |
2×PCR Mix(with dye) | 1×1mL |
保存条件
-20℃保存,打开后混匀使用,短期保存可置于4℃,避免反复冻融。
适用范围
适用于常规PCR扩增。
反应体系
组分 | 体积 (µL) |
Genomic DNA* | x |
2× Taq Mix (with Dye) | 10 |
Forward Primer (10 μmol/L) | 0.5 |
Reverse Primer ( 10 μmol/L) | 0.5 |
ddH2O | To 20 |
*推荐20 μL反应体系模板量为50~100 ng。
反应条件
温度 | 时间 |
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95℃ | 5 min |
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95℃ | 10~20 sec | 35~50个循环 |
56~64℃* | 10~30 sec |
72℃ | 10~60 sec |
72℃ | 5 min |
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*具体退火温度应根据所设计的引物来选择。
注意事项
1. 体系配制
PCR反应体系请在冰上进行配制,之后再置于PCR仪上进行反应。这样可以减少在反应准备阶段发生的非特异扩增,有助于得到高特异性的扩增结果。
2. 引物设计