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2×PCR Mix (with dye) (PCR预混液含染料)
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2×PCR Mix (with dye) (PCR预混液含染料) 
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编号: YDD001
品牌: 武汉有度生物
声明: 仅用于科学研究,不得用于临床诊断或治疗
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2×PCR Mix (with dye) 使用说明书

产品简介

本产品包含PCR扩增过程所需成分并经过优化处理,实验过程只需加入引物和模板即可进行扩增,减少了移液操作,提高了检测通量和结果的准确性。本品含有红色染料,可在反应结束后直接进行电泳,无需再加上样缓冲液,使用方便。PCR产物的3'端带A,可直接克隆至T载体。

产品组分

组分

规格

2×PCR Mix(with dye)

1×1mL

保存条件

-20℃保存,打开后混匀使用,短期保存可置于4℃,避免反复冻融。

适用范围

适用于常规PCR扩增。

反应体系

组分

体积 (µL)

Genomic DNA*

x

2× Taq Mix (with Dye)

10

Forward Primer (10 μmol/L)

0.5

Reverse Primer ( 10 μmol/L)

0.5

ddH2O

To 20

*推荐20 μL反应体系模板量为50~100 ng。

反应条件

温度

时间


95℃

5 min


95℃

10~20 sec

35~50个循环

56~64℃*

10~30 sec

72℃

10~60 sec

72℃

5 min


*具体退火温度应根据所设计的引物来选择。

注意事项

1. 体系配制

PCR反应体系请在冰上进行配制,之后再置于PCR仪上进行反应。这样可以减少在反应准备阶段发生的非特异扩增,有助于得到高特异性的扩增结果。

2. 引物设计

  • 引物3'端最后一个碱基最好为G或者C;

  • 正向引物和反向引物的Tm值相差不超过1℃为佳;

  • 引物的GC含量控制在40% - 60%之间;

  • 引物A、G、C、T整体分布要尽量均匀,避免使用GC或者AT含量高的区域;

  • 引物设计完毕请使用NCBI BLAST功能检索引物特异性,以避免非特异性扩增产生。

友情链接:
联系电话:027-87707448  总部湖北省武汉市洪山区关山街道珞喻东路4号慧谷时空2508,分部实验基地:鄂州市华容区东湖高新智慧城11栋
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